Plasminogen activator
タンパク質の特徴
Organism | Homo sapiens |
Synthesized region | 36Ser - 40Ile / 211Gly - 562Pro (+FLAG) |
UniProt ID | |
Length | 368 a.a. |
Molecular weight | 41,072 Da |
No. of disulfide bonds | 9 |
合成反応
基本条件
鋳型の種類 | PCR産物 (1 ng/µL reaction) |
使用したキット | |
合成条件 | 0.5 mM Cysteine 4 mM GSH |
合成温度と時間 | 30℃、24 hrs |
検討内容
添加量
hPDI | GSSG | hEro1α | DsbC |
10 µM | 2 mM | 0.125 µM | 20 µM |
条件の組み合わせ
GSSG | hEro1α | |
hPDI | + / - | + / - |
DsbC | + / - | - |
Isomeraseなし | - | - |
合成結果
還元ゲルでタンパク質の合成量を比較すると、添加剤に条件にかかわらずほとんど差が見られませんでしたが、活性は反応条件により大きく異なりました。酸化環境下にすると、Isomeraseの種類にかかわらず、添加することで活性が得られました。hPDIの場合、GSSG（酸化剤）の代わりにEro1α（PDIの酸化酵素）を組み合わせても活性を示します。
合成産物の確認
合成したタンパク質の還元型は "red" 、酸化型は "oxi" で示しています。
活性の評価
