Plasminogen activator
タンパク質の特徴
Organism |
Homo sapiens |
Synthesized region |
36Ser - 40Ile / 211Gly - 562Pro (+FLAG) |
UniProt ID |
|
Length |
368 a.a. |
Molecular weight |
41,072 Da |
No. of disulfide bonds |
9 |
合成反応
基本条件
鋳型の種類 |
PCR産物 (1 ng/µL reaction) |
使用したキット |
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合成条件 |
0.5 mM Cysteine
4 mM GSH
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合成温度と時間 |
30℃、24 hrs |
検討内容
添加量
hPDI |
GSSG |
hEro1α |
DsbC |
10 µM |
2 mM |
0.125 µM |
20 µM |
条件の組み合わせ
GSSG |
hEro1α |
|
hPDI |
+ / - |
+ / - |
DsbC |
+ / - |
- |
Isomeraseなし |
- |
- |
合成結果
還元ゲルでタンパク質の合成量を比較すると、添加剤に条件にかかわらずほとんど差が見られませんでしたが、活性は反応条件により大きく異なりました。酸化環境下にすると、Isomeraseの種類にかかわらず、添加することで活性が得られました。hPDIの場合、GSSG（酸化剤）の代わりにEro1α（PDIの酸化酵素）を組み合わせても活性を示します。
合成産物の確認
合成したタンパク質の還元型は "red" 、酸化型は "oxi" で示しています。
活性の評価
