Gaussia Luciferase
タンパク質の特徴
Organism | Gaussia princeps |
Synthesized region | 18 Lys - 185 Asp (+FLAG-His6) |
UniProt ID | |
Length | 187 a.a. |
Molecular weight | 20,407 Da |
No. of disulfide bonds | 5 |
合成反応
基本条件
鋳型の種類 | PCR産物 (1 ng/µL reaction) |
使用したキット | |
合成条件 | 0.5 mM Cysteine 4 mM GSH |
合成温度と時間 | 37℃、4 hrs |
検討内容
添加量
hPDI | hEro1α | DsbC | GSSG |
10 µM | 0.125 µM | 20 µM | 1 mM |
条件の組み合わせ
GSSG | hEro1α | |
hPDI | - | + / - |
DsbC | - | - |
合成結果
合成産物の確認
合成したタンパク質の還元型は”red”、酸化型は”oxi”示しています。”Reduced”のSDS-PAGEは、還元条件下で泳動しており、反応条件により合成量の差はほとんど見られませんでしたが、活性の強さが異なる結果が得られました。GSSG（酸化剤）単独でも活性が得られた一方、hPDIを使用した場合は、hEro1αが必須であるという結果が得られました。
活性の評価
