Gaussia Luciferase
タンパク質の特徴
Organism |
Gaussia princeps |
Synthesized region |
18 Lys - 185 Asp (+FLAG-His6) |
UniProt ID |
|
Length |
187 a.a. |
Molecular weight |
20,407 Da |
No. of disulfide bonds |
5 |
合成反応
基本条件
鋳型の種類 |
PCR産物 (1 ng/µL reaction) |
使用したキット |
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合成条件 |
0.5 mM Cysteine
4 mM GSH
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合成温度と時間 |
37℃、4 hrs |
検討内容
添加量
hPDI |
hEro1α |
DsbC |
GSSG |
10 µM |
0.125 µM |
20 µM |
1 mM |
条件の組み合わせ
GSSG |
hEro1α |
|
hPDI |
- |
+ / - |
DsbC |
- |
- |
合成結果
合成産物の確認
合成したタンパク質の還元型は”red”、酸化型は”oxi”示しています。”Reduced”のSDS-PAGEは、還元条件下で泳動しており、反応条件により合成量の差はほとんど見られませんでしたが、活性の強さが異なる結果が得られました。GSSG（酸化剤）単独でも活性が得られた一方、hPDIを使用した場合は、hEro1αが必須であるという結果が得られました。
活性の評価
