Acid phosphatase (AppA)
タンパク質の特徴
Organism |
Escherichia coli |
Synthesized region |
23 Glun - 432 Leu (+FLAG) |
UniProt ID |
|
Length |
421 a.a. |
Molecular weight |
45,959 Da |
No. of disulfide bonds |
4 |
合成反応
基本条件
鋳型の種類 |
PCR産物 (1 ng/µL reaction) |
使用したキット |
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合成条件 |
0.5 mM Cysteine
4 mM GSH
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合成温度と時間 |
37℃、4 hrs |
検討内容
添加量
hPDI |
GSSG |
hEro1α |
DsbC |
DnaK Mix |
2 µM |
2 mM |
0.2 µM |
4 µM |
5 µM DnaK
1 µM DnaJ
1 µM GrpE
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条件の組み合わせ
GSSG |
hEro1α |
DnaK Mix |
|
hPDI |
+ / - |
+ / - |
+ / - |
DsbC |
+ / - |
- |
+ / - |
Isomeraseなし |
+ / - |
- |
+ / - |
合成結果
シャペロンの添加効果が高く、GSSGやIsomeraseを含まなくても活性が得られました。
合成産物の確認
合成したタンパク質の還元型は "red" 、酸化型は "oxi" で示しています。
活性の評価
