Acid phosphatase (AppA)
タンパク質の特徴
Organism | Escherichia coli |
Synthesized region | 23 Glun - 432 Leu (+FLAG) |
UniProt ID | |
Length | 421 a.a. |
Molecular weight | 45,959 Da |
No. of disulfide bonds | 4 |
合成反応
基本条件
鋳型の種類 | PCR産物 (1 ng/µL reaction) |
使用したキット | |
合成条件 | 0.5 mM Cysteine 4 mM GSH |
合成温度と時間 | 37℃、4 hrs |
検討内容
添加量
hPDI | GSSG | hEro1α | DsbC | DnaK Mix |
2 µM | 2 mM | 0.2 µM | 4 µM | 5 µM DnaK 1 µM DnaJ 1 µM GrpE |
条件の組み合わせ
GSSG | hEro1α | DnaK Mix | |
hPDI | + / - | + / - | + / - |
DsbC | + / - | - | + / - |
Isomeraseなし | + / - | - | + / - |
合成結果
シャペロンの添加効果が高く、GSSGやIsomeraseを含まなくても活性が得られました。
合成産物の確認
合成したタンパク質の還元型は "red" 、酸化型は "oxi" で示しています。
活性の評価
